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Phage display

Origem: Wikipédia, a enciclopédia livre.

Bases do sistema do Phage display consiste na apresentação de peptídeos exógenos na superfície de fagos filamentosos, vírus que infectam células bacterianas. Isso foi demonstrado primeiramente por G. Smith em 1985 e, desde então, o Phage display tem sido amplamente empregado com a finalidade de identificar ligantes através de interações moleculares e obter informações sobre a relação receptor-ligante. A apresentação do peptídeo pelo fago é possível, pois , nesse sistema, seqüências aleatórias de DNA são introduzidas no gene que codifica a proteína do capsídeo do fago (camada externa e protetora). Desta forma, seqüências aleatórias de peptídeos fundidas à proteína do capsídeo (pIII ou pVIII, dependendo do sistema a ser empregado) são geradas durante a produção da partícula viral (Smith, GP, 1985). No fim do processo, bilhões de bacteriófagos são gerados, cada um deles apresentando um peptídeo diferente. Esta coleção de partículas virais recebe o nome de biblioteca apresentadora de peptídeos. Estas bibliotecas de peptídeos são, então, incubadas com as moléculas alvo do estudo (receptores purificados, células expressando seus receptores de superfície, anticorpos entre outros). Este processo denominado biopanning, ou simplesmente panning, permite selecionar os fagos ligantes, expressando peptídeos que mimetizam ligantes naturais destas moléculas (Barbas III,  Silverman, GJ, 2001). Como forma de validar o sistema, alguns grupos relataram a identificação da seqüência RGD em pannings com integrinas (Koivunen, E. et al, 1993), enquanto outros identificaram peptídeos que mimetizam substratos naturais em pannings com suas correspondentes enzimas proteolíticas (Cloutier, SM 2002). No início, o sistema Phage display foi empregado para a identificação de epitopos de anticorpos (Smith, GP, 1985). Logo ficou claro que o Phage display tinha um potencial muito grande e outras aplicações surgiram, como a identificação de peptídeos ligantes a moléculas de adesão, enzimas proteolíticas entre outras.

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